液相色譜柱的常見(jiàn)故障及解決方法

　　液相色譜柱在使用一段時(shí)間后，會(huì )出現一定的常見(jiàn)故障，如果不能很好的判斷并解決就會(huì )影響色譜柱的使用效果，從而影響樣品的分析結果。
 

　　液相色譜柱常見(jiàn)的幾種故障判斷及排除方法：
 

　　1柱壓?jiǎn)?wèn)題柱壓?jiǎn)?wèn)題是使用高效液相色譜過(guò)程中需要密切注意的地方，柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩定并不是 指壓力值穩定于一個(gè)恒定值而是指壓力波動(dòng)范圍在50PSI(3.3 Bar)之間(在使用梯度洗脫時(shí)，柱壓平穩緩慢的變化是允許的)。壓力過(guò)高、過(guò)低都屬于柱壓?jiǎn)?wèn)題。
 

　　1.1 壓力過(guò)高 這是高效液相在使用中較常見(jiàn)的問(wèn)題，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時(shí)，我們應該分段進(jìn)行檢查。
 

　　(1).首先斷開(kāi)真空泵的入口處，此時(shí)PEEK管里充滿(mǎn)液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過(guò)濾頭正常，在檢查；
 

　　(2).打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子，如果壓力沒(méi)有明顯下降，則是過(guò)濾白頭堵塞。處理方法：將過(guò)濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至100PSI (6.7 Bar)以下，過(guò)濾白頭正常，在檢查；
 

　　(3).把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質(zhì)導致堵塞，則要用比現在流動(dòng)相更強的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(cháng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。
 

　　1.2壓力過(guò)低壓力過(guò)低的現象一般是由于系統泄漏，處理方法：尋找各個(gè)接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。當然還有一個(gè)原因就是泵里進(jìn)了空氣，但此時(shí)表現的往往是壓力不穩，忽高忽低，更嚴重一點(diǎn)會(huì )導致泵無(wú)法吸上液體。處理方法：打開(kāi)Purge閥，用3~5ml/min的流速沖洗，如果不行，則要用專(zhuān)用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。
 

　　2漂移問(wèn)題 主要包括基線(xiàn)漂移和保留時(shí)間漂移。
 

　　2.1基線(xiàn)漂移 一般說(shuō)來(lái)，機器剛起動(dòng)時(shí)，基線(xiàn)容易漂移，大概要半個(gè)小時(shí)的平衡時(shí)間，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽，還有就是在低波長(cháng)下(220nm)平衡時(shí)間相對會(huì )比較長(cháng)，但如果你在實(shí)驗過(guò)程中發(fā)現基線(xiàn)漂移，則你要考慮下面的原因：
 

　　1.紫外燈能量不足。解決方法：更換新的紫外燈
 

　　2.柱溫波動(dòng)。解決方法：控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，檢查是否有打開(kāi)的窗戶(hù)或空調對著(zhù)柱溫箱。
 

　　3.流通池被污染或有氣體。 解決方法：用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池(較好斷開(kāi)柱子)。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
 

　　4.流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。解決方法：檢查流動(dòng)相的組成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑。
 

　　5、樣品中有強保留的物質(zhì)(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現出一個(gè)逐步升高的基線(xiàn)。解決方法：使用保護柱，如有必要，在進(jìn)樣之間。在分析過(guò)程中，定期用強溶劑沖洗柱子。
 

　　6、檢測器沒(méi)有設定在較大吸收波長(cháng)處。解決方法：將波長(cháng)調整至較大吸收波長(cháng)處
 

　　7、流動(dòng)相的PH值沒(méi)有調節好。解決方法：加適量的酸或堿調至較佳PH值