液相色譜柱的故障處理方法

氣泡溢出

　　流動(dòng)相內有氣泡，關(guān)閉泵，打開(kāi)泄壓閥，打開(kāi)purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過(guò)濾器冒出，進(jìn)入流動(dòng)相，無(wú)論打開(kāi)purge鍵幾次，都無(wú)法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過(guò)濾器長(cháng)期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,過(guò)濾器內部由于霉菌的生長(cháng)繁殖，形成菌團，阻塞了過(guò)濾器，緩沖液難以流暢地通過(guò)過(guò)濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過(guò)濾器進(jìn)入流動(dòng)相。處理過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí)，輕輕震蕩幾次，再將過(guò)濾器用純水清洗幾次，打開(kāi)泄壓閥，打開(kāi)purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過(guò)濾器冒出，繼續將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒(méi)有氣泡不斷從過(guò)濾器中冒出，說(shuō)明過(guò)濾器內部的霉菌菌團已被硝酸破壞，流動(dòng)相可以流暢地通過(guò)過(guò)濾器。打開(kāi)泄壓閥，打開(kāi)泵，流速調至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過(guò)濾器1小時(shí)左右。即可將過(guò)濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時(shí)即可。液相色譜柱的故障處理方法

　　柱壓高

　?、啪彌_液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內;

　?、茦悠肺廴境练e。處理對于*種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，換成甲醇沖洗，接著(zhù)用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

　　無(wú)指示

　?、疟妹芊鈮|圈磨損;

　?、拼罅繗馀葸M(jìn)入泵體。處理對于*種情況，更換密封墊圈;對于第二種情況，在泵作用的同時(shí)，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

　　不穩定

　　原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀(guān)察流動(dòng)相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動(dòng)相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。液相色譜柱的故障處理方法

　　峰分叉

　?、派V柱被污染;

　?、浦^填料塌陷。處理對于*種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著(zhù)用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(cháng)短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第二種情況，擰開(kāi)柱頭，檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復幾次，直至裝滿(mǎn)填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30分鐘以上。

　　重復性差

　?、胚M(jìn)樣閥漏液;

　?、萍訕俞槻坏轿?。

　?、且毫坎蛔?

　　處理對于*種情況更換進(jìn)樣閥墊圈;對于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態(tài)轉換到INJECT狀態(tài)，以保證進(jìn)樣量的準確。日常工作中，液相色譜儀的保養非常重要，如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統和高壓泵中，儲液器內的溶液如長(cháng)時(shí)間未用應清洗儲液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無(wú)機鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，*溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長(cháng)色譜柱的使用壽命，同時(shí)避免注射過(guò)濃的樣品溶液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內析出固體引起堵塞;色譜柱作好標記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。